SEPARACIÓN CELULAR MAGNÉTICA

La separación celular magnética es una técnica innovadora que ha revolucionado la purificación de células en la investigación y aplicaciones clínicas. Basada en partículas magnéticas, permite aislar selectivamente células de interés, ofreciendo precisión y eficiencia. En este artículo, exploraremos cómo esta técnica ha transformado las ciencias biológicas y su impacto en la medicina.

El aislamiento de una población celular específica a partir de una muestra heterogénea se ha convertido en un procedimiento común en los laboratorios. La disponibilidad de anticuerpos altamente específicos así como la demanda de aplicaciones definidas, sigue ensanchando los límites de la separación célular. Hasta el momento, las técnicas que se han utilizado para este fin son:

  • Métodos basados ​​centrifugación.
  • Clasificación  de células activadas por fluorescencia (FACS)
  • Separación celular magnética.

Tanto la técnica FACS como la separación celular magnética, ofrecen la ventaja de conseguir un aislamiento más específico, ya que utilizan anticuerpos para seleccionar la población diana. Sin embargo, difieren fundamentalmente en su modo de acción.

FACS

La técnica de clasificación de células activadas por fluorescencia, conocida como FACS o Fluorescence-Activated Cell Sorting en inglés, representa un enfoque especializado dentro del ámbito de la citometría de flujo. Su principal función es permitir la separación y selección de células de manera individualizada en dos o más tubos, a partir de una compleja mezcla de diferentes poblaciones celulares. Esta separación se logra teniendo en cuenta las características específicas de cada célula, tales como su dispersión de luz y niveles de fluorescencia.

 

Un protocolo por el cuál a partir de una mézcla de células en líquido se consigue obtener 3 poblaciones celulares distintas.

El proceso comienza con la suspensión de células, que es dirigida hacia el centro de una corriente de líquido estrecha y de rápido flujo. Esta disposición del flujo garantiza una amplia separación entre las células en función de su tamaño. La clave para su funcionamiento radica en un mecanismo de vibración ultrasónica que fragmenta la corriente de líquido que contiene las células en pequeñas gotas. Un cuidadoso ajuste del sistema asegura que haya una baja probabilidad de que más de una célula quede contenida en cada gota.

Justo antes de que estas gotas se formen, el flujo atraviesa una cámara especial donde las células son excitadas por láseres y se mide la fluorescencia característica de cada una. En este punto crítico, se coloca un anillo con la capacidad de adquirir una carga eléctrica. Dependiendo de la medición de la intensidad de fluorescencia de cada célula, el sistema asigna una carga eléctrica específica al anillo. Como resultado, las gotas que se desprenden de la corriente de líquido quedan cargadas eléctricamente, con una polaridad opuesta a la del anillo. Posteriormente, estas gotas cargadas son dirigidas a través de un sistema de deflexión electrostática que las redirige a diferentes tubos de recolección, dependiendo de su carga eléctrica respectiva.

Separación Celular Magnética

En la técnica de separación celular magnética, los anticuerpos específicos se conjugan con partículas magnéticas y se unirán a las células que expresan el antígeno diana. Gracias a la aplicación de un campo magnético, las células serán atraidas hacia el imán, separándolas del resto de las poblaciones celulares. Alternativamente, se puede realizar un proceso de separación de dos pasos, por ejemplo, utilizando anticuerpos conjugados con biotina seguido de partículas magnéticas conjugadas con estreptavidina.

Hay dos tipos de selección...

La separación de las células puede ocurrir a través de “selección positiva” o “selección negativa”. Esto depende de si los anticuerpos ligados a las nanopartículas magnéticas se dirigen directamente a las células de interés (selección positiva) o a las células no deseadas (selección negativa). De cualquier manera, ambas fracciones separadas de células puede ser utilizado para aplicaciones posteriores.

Nuestros productos: Selección Positiva

Palex comercializa los reactivos MOJOSORT™ para realizar separación celular magnética de la empresa Biolegend, tanto para realizar selección positiva como negativa. Las nanopartículas Mojosort™ son partículas magnéticas directamente conjugadas con anticuerpos (selección positiva) o estreptavidina. También están disponibles Kits de aislamiento Mojosort™ que contienen un cóctel-biotina de anticuerpos unidos a biotina y nanopartículas conjugadas con estreptavidina para aislar a una población de células intactas. Para utilizar estos productos, también necesita un tampón de separación y un sistema de separación magnética. Recomendamos nuestro MojoSort ™ Buffer (Cat. No. 480017) y el Imán ™ MojoSort (Cat. No. 480019).

El protocolo y los productos disponibles para la selección positiva son:

DESCRIPCIÓN

REFERENCIA

PROTOCOLO

MojoSort™ Mouse CD19 Nanobeads

480001

No wash protocol

480002

MojoSort™ Human CD4 Nanobeads

480013

No wash protocol

480014

Other MojoSort™ Antibody Conjugated Nanobeads

 

Regular protocol

Nuestros productos: Selección Negativa

El protocolo y los productos disponibles para la selección negativa son:

DESCRIPCIÓN

REFERENCIA

PROTOCOLO

Human CD3 T Cell Isolation Kit

480021 y 480022

No wash protocol

Mouse CD3 T Cell Isolation Kit

480023 y 480024

No wash protocol

Human CD4 T Cell Isolation Kit

480009 y 480010

No wash protocol

Mouse CD4 T Cell Isolation Kit

480005 y 480006

No wash protocol

MojoSort™ Human CD8 T Cell Isolation Kit

480011 y 480012

No wash protocol

MojoSort™ Mouse CD8 T Cell Isolation Kit

480007 y 480008  

No wash protocol

Other MojoSort™ Isolation Kits

 

Regular protocol

Otros productos de interés

DESCRIPCIÓN

REFERENCIA

MojoSort™ Buffer (5X)

480017

MojoSort™ Magnet

480019

Puedes ver un vídeo sobre este sistema de separación magnética pinchando en el enlace:

https://www.biolegend.com/en-us/videos/biolegend-mojosort-protocol-video 

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